Определение размеров диаметра эритроцитов осуществляется методом эритроцитометрии, который является тонкой функциональной пробой для выявления ранних особенностей гематологической реакции у онкологических больных, при лучевом воздействии и заболеваниях крови. Этот метод прост по своему техническому выполнению, поддается объективному учету и не требует сложных приспособлений.
Графическое изображение анизоцитоза на кривой Прайс-Джонса имеет большое практическое значение, как метод, отражающий сдвиги костно-мозгового кроветворения.
Между тем еще и до настоящего времени о степени анизоцитоза обычно судят по данным простого просмотра мазков крови, к тому же без указания направленности анизоцитоза, что приводит к грубым диагностическим ошибкам.
Известно, что в нормальной крови человека наблюдается физиологический анизоцитоз, причем главная масса, 70—80% эритроцитов, относится к нормоцитам, остальные 20—30% — к макро-микроцитам. Прайс-Джонс получил нормальную эритроцитометрическую кривую на основании измерения диаметра эритроцитов 100 здоровых лиц. Вершина такой кривой («пик») соответствует величине среднего диаметра. Отклонение вершины кривой с соответствующими изменениями ее основания носит название патологического анизоцитоза (сдвиг вправо соответствует макроцитозу, влево —- микроцитозу).
Макроцитоз и микроцитоз, как проявление патологического анизоцитоза, имеют различное значение: макроциты являются благоприятными признаками регенерации. При макроцитарных реакциях количество эритроцитов быстро восстанавливается. Микроциты, будучи мало стойкими элементами, являются дегенеративными формами эритроцитов и свидетельствуют о недостаточности костно-мозгового кроветворения. При микроцитарных реакциях восстановление эритроцитов происходит очень медленно.
Изменение диаметра эритроцитов имеет определенное дифференциально-диагностическое значение. Этот гематологический признак не только сопутствует анемиям, но иногда появляется раньше других качественных показателей, когда нет еще особых изменений общего количества эритроцитов и гемоглобина. Патологический анизоцитоз эритроцитов отражает глубокие нарушения процессов эритропоэза и позволяет обнаружить анемию на ранних этапах ее развития, а также установить ее характер в отношении нормо-макро-микроцитарного типа.
При таких заболеваниях, как врожденная гемолитическая желтуха и В12 дефицитная анемия при болезни Бирмера, размеры диаметра эритроцитов берутся за основу при клиническом диагнозе заболевания. В первом случае превалируют микроциты — сфероциты, во втором — макро-мегалоциты. Целесообразно и практически важно пользоваться методом эритроцитометрии при установлении анемий у онкологических больных и при лучевых повреждениях. Это тем более важно, что у больных раком и облученных, клинически и гематологически анемии проявляются сравнительно поздно.
С помощью метода эритроцитометрии анемизацию у больных раком можно выявить значительно раньше, чем это принято считать, если исходить из оценки обычных показателей красной крови. Нарушение процессов эритропоэза наступает уже на ранних стадиях развития болезни, проявлением его служит микроцитемия эритроцитов периферической крови. И только в более поздних стадиях анемия по своему клиническому течению принимает выраженный характер. Ранее появившаяся микроцитемия в дальнейшем сочетается с гипохромемией, т. е. анемия приобретает черты железо-дефицитной. Отсюда легко сделать практический вывод о необходимости раннего применения препаратов железа. И, действительно, рациональная терапия железом оказывает благоприятное действие— выравнивается эритроцитометрическая кривая, а также улучшается общее состояние больных.
В условиях развития экспериментальной анемии под действием ионизирующей радиации, при исследовании крови в динамике методом эритроцитометрии, также выявляются патологические изменения со стороны эритроцитов, которые выражаются в уменьшении диаметра их, наступающем через одни-двое суток после облучения. К шестым-восьмым суткам эритроцитометрическая кривая резко сдвинута влево, в то время как количество эритроцитов заметно снижается только к десятым-четырнадцатым суткам. Со стороны костного мозга отмечена эритробластическая реакция с преобладанием эритробластов микрогенерации. Спедовательно, микроцитоз эритроцитов является важным гематологическим симптомом, предвестником лучевой анемии.
Методика эритроцитометрии. Окрашивание препаратов крови для измерения диаметра эритроцитов, согласно литературным указаниям, производится обычными красителями крови. Мы предлагаем заменить эту окраску фуксином. При окраске препаратов раствором фуксина контуры эритроцитов выступают значительно отчетливее, что облегчает сам процесс измерения и дает более точные результаты. Пропись окраски следующая: раствор карбол-фуксина, приготовленный по способу, употребляемому при окраске туберкулезной палочки, разводится спиртом в два раза, затем дистиллированной водой в четыре раза. Препарат, предварительно фиксированный метиловым алкоголем, заливают толстым слоем краски на 1 мин., после чего смывают водой и высушивают на воздухе.
Измерение диаметра эритроцитов производится окуляр-микрометром путем прямого отсчета делении измерительной линейки при постоянной оптической системе микроскопа. При этом необходимо измерять два диаметра и вывести из них средние цифры. Величину делений измерительной линейки необходимо заранее установить по объектмикрометру. В приводимом случае одно деление окуляр-микрометра равно 1,18 микрона. При исследовании измеряется диаметр 200 эритроцитов. Для получения исходных цифр желательно всегда располагать сравнительными собственными данными, полученными у здоровых лиц.
Средний показатель величины диаметра эритроцитов для большей наглядности желательно изображать графически в виде эритроцитометрической кривой. С методологической целью мы представляем несколько кривых: первая из них соответствует нормальному составу эритроцитов, последующие — составу эритроцитов больной раком шейки матки первой степени до, в процессе и в конце курса лечения комплексными соединениями железа. При нанесении показателей размеров диаметра эритроцитов на кривую получается ясное представление о степени и характере анизоцитоза. Не менее ясно выступают и изменения конфигурации кривых после того или иного воздействия на организм.
Данные, полученные методом эритроцитометрии, могут быть также использованы и при проведении научно-экспериментальных исследований. При лучевых повреждениях отчетливо проявляются явления апизоцитоза эритроцитов крови лабораторных животных.