ПРИЧИНЫ И СИМПТОМЫ    ОНКОЛОГИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ    ПРЕДРАК    ДИАГНОСТИКА    МЕТОДЫ ЛЕЧЕНИЯ    РЕАБИЛИТАЦИЯ    ЛЕКАРСТВА    НОВОСТИ ОНКОЛОГИИ
А Б В Г Д Е Ж З И К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Ч Ш Щ Э Ю Я
Где лечить рак:   Россия Израиль Германия США Швейцария Корея Венгрия Польша Беларусь Франция Испания Италия Китай Чехия Канада Турция Финляндия Япония Австрия Бразилия Сингапур Латвия Литва Великобритания
Употребляя в пищу определенные продукты, можно уменьшить риск появления онкозаболеваний. Какие же продукты способны предотвратить рак?   Узнать >>
Какие анализы необходимо сдавать, чтобы диагностировать рак на начальной стадии, увеличив тем самым шансы на успешное лечение?   Узнать >>
Как влияет химиотерапия на организм онкологического больного? Насколько могут быть тяжелыми побочные эффекты?   Узнать >>
Каковы первые признаки рака? На что обратить внимание? Как не упустить начало онкологического заболевания?   Узнать >>

Лечение рака >> Книги по онкологии >>

Перевиваемые опухоли


«Модели и методы экспериментальной онкологии»
Под ред. А. Д. Тимофеевского
Гос. изд-во мед. лит-ры «Медгиз», М., 1960 г.
OCR Wincancer.Ru
Приведено с некоторыми сокращениями

Первой экспериментальной моделью злокачественного роста явились перевиваемые опухоли. В 1875 г. М. А. Новинскому впервые удалось перевить опухоль от одного животного на другое. Разработкой метода перевивок опухолей было положено начало экспериментальной онкологии. Многочисленные сведения, полученные при изучении перевиваемых опухолей, сыграли исключительно важную роль в развитии современного представления о сущности опухолевого роста.

Однако перевиваемые опухоли животных являются более отдаленной моделью опухолей человека, чем спонтанные и индуцированные опухоли. Последние стоят ближе к опухолям человека прежде всего в том отношении, что они образуются в организме заново, в то время, как при перевивке происходит лишь перенос возникшей опухоли от одного животного к другому. В то же время перевиваемые опухоли имеют ряд значительных преимуществ перед спонтанными и индуцированными. Во-первых, они делают возможной постановку массовых экспериментов, так как легко и быстро могут быть получены в большом количестве. Другим преимуществом штаммов перевиваемых опухолей является относительное постоянство их строения и биологических свойств.

В противоположность этому спонтанные и индуцированные опухоли одного и того же тканевого происхождения значительно варьируют по своему строению, темпу и характеру роста, что, конечно, весьма затрудняет оценку результатов любого биологического опыта. Указанные преимущества перевиваемых опухолей как экспериментальной модели делают их незаменимым средством в области экспериментальной терапии опухолей и главным образом при первичном отборе противоопухолевых препаратов.

Резко возросший в последнее время интерес к экспериментальной терапии опухолей определяет то внимание, которое уделяется перевиваемым опухолям и получению новых штаммов их. Один из наиболее полных обзоров по перевиваемым опухолям, из имеющихся в отечественной литературе, опубликован А. Д. Тимофеевским. В 1953 г. была опубликована большая сводка по перевиваемым опухолям за рубежом. Аналогичная сводка по имеющимся в Советском Союзе штаммам перевиваемых опухолей недавно составлена Е. Е. Погосянц. Особое внимание в настоящее время привлекает получение так называемых асцитных вариантов перевиваемых опухолей, т. е. штаммов, которые при прививке внутрибрюшинно вызывают образование эксудата, содержащего свободные опухолевые клетки.

Настоящая статья имеет целью описание методик перевивок опухолей и свойств наиболее известных штаммов перевиваемых опухолей. Приводимые ниже материалы основаны главным образом на данных литературы и на результатах контрольных опытов сотрудников Лаборатории экспериментальной химиотерапии (зав. — член-корреспондент АМН СССР проф. Л. Ф. Ларионов) и Лаборатории опухолевых штаммов (зав. — доктор биологических наук Е. Е. Погосянц) Института экспериментальной и клинической онкологии АМН СССР.

Методика прививки опухолей


Прививка опухолей, растущих под кожей. Опухоль, подлежащая перевивке, должна быть быстро растущей и достаточно большой. Опухоль Эрлиха и крокеровскую саркому лучше всего брать на 10—14-й день от перевивки, гепатому — на 15—20-й, карциному Герена — на 10—14-й, саркомы М-1 и 45 — на 14—21-й, опухоль Броуна-Пирс— на 20—30-й день. Перевивать опухоли можно раньше и позже указанных сроков, однако в последнем случае необходимо особенно тщательно освобождать опухолевый материал от некроза, иначе перевиваемость будет низкой, а скорость роста опухолей уменьшится. При появлении некроза кожи над опухолью возникает опасность инфицирования последней, а потому такие опухоли для перевивки лучше не брать.

Материал берут в боксе, при отсутствии последнего — в лабораторной комнате без сквозняков. Инструменты, посуду, руки дезинфицируют обычным способом. Помощник забивает животное, укрепляет его, смазывает кожу над опухолью и в окружности ее 70% спиртом с небольшим количеством настойки йода. Мышь можно опустить в слабый раствор йода или 3% раствор фенола целиком. Затем, отступив на 1—2 см от опухоли, проводят разрез почти во всю длину животного и кожу отсепаровывают. Край кожного лоскута необходимо выворачивать таким образом, чтобы шерсть, которая очень плохо обеззараживается, не попадала на опухоль. Удобно захватить край кожного лоскута 2—3 зажимами Пеана или Кохера, которые и будут его фиксировать. Опухоль надрезают в продольном направлении, из ее периферической части, обращенной к мышцам брюшной стенки (а не к коже), вырезают кусочки жизнеспособной ткани, имеющей серовато-розовый цвет, и переносят в стерильную чашку Петри.

Не следует брать участки опухоли с большим количеством беловато-желтоватых вкраплений (некроз) и участки, пропитанные кровью. Если в опухоли оказалось мало жизнеспособной ткани, необходимо взять другую опухоль. Соединительнотканную капсулу удобнее отделять хирургическим пинцетом in situ, а не после иссечения опухоли. Опухоли мягкой консистенции (гепатома, карцинома Герена) лучше извлекать мелкими кусочками анатомическим пинцетом с широкими браншами. После перенесения в чашку Петри иссекают оставшиеся мелкие участки некроза, соединительнотканные прослойки, сгустки крови, наличие которых ухудшает условия последующего приживления; кусочки ополаскивают стерильным физиологическим раствором и переносят в другую чашку Петри. Эту процедуру повторяют два-три раза, а если имелось большое количество некротической ткани, то пять-шесть раз. Таким образом вымывают остатки крови и мелкие, микроскопических размеров очажки некроза.

Ю. Н. Мольков показал, что после промывания кусочков саркомы М-1 физиологическим раствором один-два раза такой материл прививался в 60%, причем в 7—8% опухоли рассасывались. После многократной промывки (5—8 раз) опухоль прививалась в 100% и ни в одном случае не рассасывалась. По нашим наблюдениям, это в равной мере относится и к другим опухолям.

Измельчать опухоль лучше всего острыми изогнутыми тупоконечными ножницами. Время, необходимое для достаточного измельчения опухоли, значительно варьирует в зависимости от вида опухоли и количества опухолевой ткани, во всяком случае полученная взвесь должна проходить через иглу большого и среднего калибра. Даже при небольшом навыке определить нужную степень измельчения удается на глаз. Для размельчения опухолевой ткани можно пользоваться также механическим гомогенизатором (блендером), особенно когда необходимо большое количество прививочного материала. Однако при этом нужно обращать особое внимание на стерилизацию аппарата и не допускать чрезмерного измельчения опухоли, так как в противном случае прививаемость может упасть до нуля. Полученную опухолевую кашицу разводят физиологическим раствором в отношении 1 : 5 или 1 : 10 по весу.

Опухоли мышей следует прививать иглой среднего калибра в количестве 0,1—0,2 мл 10% взвеси, крысиные опухоли — более толстой иглой и в дозе 0,4 мл 10% взвеси. Хотя имеются четкие указания на наличие прямой зависимости прививаемости от количества введенной опухолевой ткани, прививать большие количества взвеси, по нашему мнению, излишне.

Хранить приготовленную взвесь на холоду (более суток) не следует, так как ткань при этом мацерируется. Кусочки же опухоли могут сохраняться при температуре от 0° до +4° без снижения последующей прививаемости в течение нескольких дней. Хорошие результаты получаются и после замораживания до —190°. Перед каждой инъекцией взвесь необходимо перемешивать и за один раз набирать объем взвеси на одно животное. Этим достигается большая равномерность в количестве прививаемого каждому животному опухолевого материала.

Кожу животного в месте инъекции смазывают спиртом, лучше слабой йодной настойкой. Шерсть, как правило, не удаляют, хотя попадание ее в раневой канал может привести к инфицированию опухоли. Опухоль прививают обычно под кожу правой или левой боковой поверхности тела, несколько ближе к передней конечности и к спинке. Опухоли, привитые ближе к паховому сгибу, срастаются с тканями бедра и их трудно измерять. Опухоли, привитые ближе к животу, очень быстро изъязвляются, так как животное при движении постоянно травмирует нижнюю поверхность опухоли. Особенно это относится к крысиным саркомам. Введение взвеси необходимо производить быстрым движением поршня. Сразу же после введения нужно зажать иглу пальцами левой руки по ходу раневого канала и только после этого извлечь. Этим избегается обратное затекание взвеси по ходу иглы и развивающаяся опухоль имеет правильную округлую форму одиночного узла, удобную для измерения. Отверстие в коже необходимо зажимать пальцами, смоченными спиртом. При прививке нужно следить за тем, чтобы взвесь попадала строго в подкожную клетчатку, так как при введении взвеси ближе к коже опухоль растет медленнее, а при введении в мышцу — быстрее.

Всякое отступление от правил асептики и антисептики может привести к инфицированию опухоли гноеродной флорой. Инфекция опухоли может быть явной и выражаться в образовании гнойника на месте прививки; опухоль при этом не развивается. Гораздо чаще инфекция бывает скрытой и выражается в раннем (5—8-й день) появлении некроза кожи (корочка). Центр опухоли западает, а периферические части ее в виде валика продолжают расти. Иногда инфекция приводит к образованию мелких гнойничков в ткани опухоли. О возможности инфекции опухоли, особенно скрытой, необходимо помнить при любом эксперименте, и прежде всего при массовых экспериментах по терапии опухолей, так как незамеченная исследователем инфекция может вызвать торможение роста опухоли и даже ее рассасывание и тем самым привести автора к неправильным выводам.

При случайном заражении штамма гноеродной флорой его нужно уничтожить и приобрести штамм из другого учреждения. Если последнее затруднительно, можно использовать способ Шрека с прививкой очень ограниченного количества взвеси опухолевой ткани. Опухоли возникали в значительно меньшем проценте и в более поздние сроки. Однако к этому времени опухоль силами организма очищалась от инфекции. Для очистки штаммов пользуются также прививкой в полость брюшины, мышцы (чаще в задние мышцы бедра) и, наконец, обработкой опухолевого материала раствором пенициллина или стрептомицина.

В лаборатории штаммов Института экспериментальной и клинической онкологии мелкие кусочки опухоли выдерживают в растворе пенициллина (2000 ЕД на 1 мл) в течение 15—20 минут. Для очистки от инфекции карциномы Герена пользуются прививкой отдаленных метастазов в лимфатические узлы. Все указанные способы очистки штамма, естественно, неэффективны при заражении штаммовых мышей такими инфекциями, как эктромелия, паратиф, псевдотуберкулез и т. д.

Кроме прививки взвесью пользуются прививкой кусочком ткани. Для этого в стерильной чашке Петри опухоль измельчают на кусочки величиной 1—2 мм и каждый такой кусочек или несколько их вводят либо через разрез кожи маленьким пинцетом, либо с помощью троакара, или с помощью стеклянной воронки с поршнем. Однако при указанном способе прививки получается весьма неравномерный рост опухолей, почему большинство авторов предпочитают метод прививки взвесью.

Растущие подкожно опухоли могут быть привиты в мышцу, брюшную полость, печень, селезенку, почки, головной мозг, а также внутрикожно. Растущая в мышце опухоль обладает выраженным инфильтративным ростом. Иногда пользуются прививкой опухоли в переднюю камеру глаза и внутривенно. Существует также способ прививки взвеси опухоли в ткань легкого через верхние дыхательные пути.

Прививка опухоли асцитной жидкостью. Как указывалось выше, при прививке взвеси некоторых опухолей в брюшную или плевральную полость образуется эксудат, содержащий опухолевые клетки. Прививка такой жидкости под кожу дает рост опухоли, а прививка снова в брюшную или плевральную полость — образование опухолевых узлов и ракового эксудата. Прививка асцитной жидкости удобна тем, что, во-первых, можно вводить определенные количества опухолевых клеток, во-вторых, можно легко производить повторные взятия жидкости (биопсии) в процессе экспериментального лечения. Наиболее распространенной формой асцитной опухоли является асцитный штамм опухоли Эрлиха.

Асцитическую жидкость лучше всего брать на 7—10-й день после перевивки. Если взятие асцитической жидкости представляет собой биопсию, поступают следующим способом. Помощник держит мышь вертикально, головой вверх и несколько набок, так, чтобы жидкость в силу тяжести собралась в правой подвздошной впадине. Лучше всего пользоваться шприцем на 5 мл и иглой среднего диаметра. Переднюю брюшную стенку прокалывают посередине, конец иглы продвигают по направлению к правой подвздошной впадине (не очень глубоко), после чего медленно насасывают жидкость. Если жидкость в шприце не появляется, пальцами левой руки нащупывают конец иглы в брюшной полости и освобождают его от присосавшейся петли кишечника. Если эта процедура не помогает, очень осторожными движениями смещают иглу в ту или иную сторону. Иногда помогает обратное введение в брюшную полость набранной жидкости или прочистка иглы мандреном.

Все манипуляции иглой в брюшной полости должны быть крайне осторожными, так как даже в опытных руках не исключена возможность повреждения крупных сосудов. Надо брать асцитическую жидкость через первый прокол, так как второй прокол не улучшает положения, а через первый начинает вытекать жидкость. После взятия асцитической жидкости необходимо зажимать прокол пальцами левой руки и обязательно заклеивать место укола коллодием, так как, по нашим наблюдениям, через плохо заживающее отверстие в брюшной полости часто происходит инфицирование оставшейся асцитической жидкости.

Асцитическую жидкость для прививки лучше брать у забитой мыши. Для этого при соблюдении максимально стерильных условий жидкость набирают пипеткой или шприцем с иглой через разрез или прокол брюшной стенки. При содержании большого количества фибрина в асцитической жидкости последняя может свернуться или же в ней образуются большие сгустки. Во избежание этого в нее добавляют 10—50% (по объему) 4% раствора цитрата натрия, что, по нашим наблюдениям, не отражается на прививаемости и темпе роста опухоли. Полученную асцитическую жидкость вводят обычно под кожу или в брюшную полость в количестве 0,1—0,2 мл. Если необходимо ввести определенное количество клеток, то число их подсчитывают в счетной камере и вводят объем жидкости, содержащий нужное число клеток.

Краткая характеристика некоторых штаммов перевиваемых опухолей


Опухоль Эрлиха. Эта опухоль, полученная более 50 лет назад, в начале была перевиваемой аденокарциномой, однако с увеличением числа генераций она почти полностью утратила свою тканевую специфичность и в настоящее время состоит из недифференцированных клеток. Опухоль Эрлиха существует в виде двух штаммов: подкожного и асцитного. Подкожным называют исходный штамм, который всегда поддерживался и поддерживается только путем подкожных прививок. В 1932 г. Левенталь и Ян путем прививки подкожного штамма в брюшную полость вызвали образование асцита, содержащего опухолевые клетки. При последовательных внутрибрюшинных перевивках этого асцита был получен асцитный штамм. Он растет хорошо и под кожей, однако при обратной перевивке в брюшную полость снова образуется асцит. В этом отношении асцитный штамм, растущий под кожей (подкожный вариант асцитного штамма), отличается от исходного подкожного: при прививке последнего в брюшную полость асцит не образуется. В настоящее время в Советском Союзе и за рубежом используется полученный Левенталь и Ян асцитный штамм в виде асцитного и подкожного вариантов. Исходный подкожный штамм в настоящее время практически не применяется.

Асцитный штамм опухоли Эрлиха, растущий под кожей. Опухоль прививается на мышах самых различных пород и линий в 100%. Внезапное снижение прививаемости в отдельных сериях опытов зависит от инфицирования опухолевого материала или от недостаточного освобождения его от некроза. Опухоль лучше растет у молодых мышей (2—3 месяцев, весом 18—20 г). Самопроизвольное рассасывание опухолей отмечается менее, чем в 1%. На 4—5-й день после прививки уже прощупывается узелок диаметром в 2—5 мм. К 10—12-му дню диаметр опухоли составляет 10—15 мм, а к 20—25-му дню — 20—30 мм. Средний вес опухоли к 20—25-му дню составляет 1,740 (на материале 665 прививок). Опухоль растет лучше весной и летом. По нашим данным, средний вес опухолей в ноябре — январе составляет 0,900 г; в феврале—апреле — 2,020 г, в мае—июле — 2,140 г и в августе—октябре — 1,800 г. Следует подчеркнуть, что асцитный штамм, растущий под кожей животных из разных лабораторий, может обладать довольно различным темпом роста и, по данным разных авторов, средний вес развившихся опухолей варьирует в пределах 0,360—4—5,0 г. Опухоли вначале (до 7—10-го дня) растут довольно равномерно. После этого срока возникает значительная разница в темпе роста отдельных опухолей.

Опухоль имеет вид плотного узла, окруженного тонкой капсулой. В поздние сроки развития она прорастает капсулу и окружающие ткани. Исходный подкожный штамм и асцитный штамм, растущий под кожей, дают метастазы в брюшную полость, регионарные лимфатические узлы, легкие. Частота метастазирования разных подштаммов опухоли Эрлиха может быть весьма различной — от 5 до 60%.

При микроскопическом исследовании асцитный штамм, растущий под кожей, состоит из крупных клеток часто полигональной формы, тесно примыкающих друг к другу. Протоплазма клеток отчетливо базофильная. Ядра пузырькообразны, с хорошо выраженными глыбками хроматина. Образования истинных железистых ячеек в опухоли никогда не наблюдается. В некоторых участках можно видеть псевдо-железистые структуры, возникновение которых связано с дегенеративными и некробиотическими процессами.

Значительную часть развившейся опухоли (на 15—20-й день) занимает некротическая ткань, представленная либо обширными полями, либо небольшими участками в виде полосок или округлых очагов, либо микронекрозами, захватывающими небольшие группы клеток. Количество некротической ткани в различных участках данной опухоли настолько варьирует, что сравнительная оценка интенсивности некротических процессов в нескольких опухолях возможна лишь при изучении большого числа срезов, проходящих через всю опухоль (типа кристеллеровских). Из этих же соображений каждое биохимическое исследование с опухолью Эрлиха обязательно должно иметь морфологический контроль на количество мертвой ткани.

При изучении действия различных терапевтических агентов следует помнить о том, что в опухоли Эрлиха без всякого воздействия, кроме участков некроза, могут возникать довольно обширные участки пикноза ядер и других дегенеративных изменений опухолевых клеток. Митотическая активность опухоли велика. Количество митозов в периферической и центральной части опухоли различно. Это обстоятельство также должно учитываться при изучении действия того или иного агента на митотическую активность опухоли.

Асцитный штамм опухоли Эрлиха, растущий виутрибрюшинно. Опухоль прививается в 100%. Уже на 5—7-й день после прививки можно отметить увеличение брюшка мыши за счет накопления жидкости. Обычное количество асцита на 8—10-й день — 6—7 мл, на 10—14-й день количество асцита увеличивается до 10—12 мл, в поздние сроки оно может достигать 20 мл, однако для прививки такой асцит брать не следует, так как он дает низкую прививаемость. Имеются сведения о том, что добавление в рацион мышей цельного молока резко увеличивает у них количество образующегося асцита. Количество клеток в 1 мл жидкости может варьировать от 4 до 200 млн.

Обычный цвет асцитической жидкости — желтоватый или беловатый, опалесцирующий, либо слегка розоватый. Асцит молочно-белого (примесь большого количества лейкоцитов), грязновато-бурого и красного цвета (примесь большого количества старой или свежей крови) дает прививаемость менее 100%. Образующаяся в брюшной полости жидкость содержит фибрин, живые и распадающиеся опухолевые клетки, а также небольшую примесь слущенных клеток мезотелия, лейкоцитов, эритроцитов. Гибель животных происходит чаще всего на 10—16-й день. Однако средние сроки гибели мышей для асцитного штамма опухоли Эрлиха в условиях разных лабораторий могут быть различными (14—22 дня). Прививка инфицированного кокковой флорой асцита приводит к быстрой (2—4-й день) гибели почти всех животных, либо к образованию асцита с большими, крайне рыхлыми беловато-желтоватыми сгустками фибрина.

После взятия асцитической жидкости необходимо вскрыть мышь (особенно важно в период, неблагополучный в отношении инфекции) с тем, чтобы исключить возможность перенесения с прививочным материалом общих инфекций (паратиф, эктромелия, псевдотуберкулез и др.). При вскрытии брюшной полости отмечают также наличие обсеменения опухолевыми узлами брыжейки, задней брюшной стенки, диафрагмы, реже — передней брюшной стенки.

Для микроскопического исследования асцитической жидкости приготовляют мазки, которые обычно фиксируют и окрашивают как мазки крови. Опухолевые клетки представляют собой в высшей степени дедифференцированные элементы довольно разнообразной величины. Ядра клеток крупные с грубой сетью хроматина и несколькими ядрышками. В узком ободке резко базофильной протоплазмы отмечаются различной величины вакуоли.

Являясь опухолью, почти полностью утерявшей свою тканевую специфичность, опухоль Эрлиха не может служить экспериментальной моделью злокачественной эпителиальной опухоли. Тем не менее быстрый темп роста и высокая степень злокачественности данного штамма делают его ценным тест-объектом при экспериментальной терапии опухолей, в частности при первичном отборе химиопрепаратов. Менее пригодна опухоль Эрлиха для изучения вопросов биохимии и иммунологии опухолей вследствие рано развивающихся и выраженных дегенеративно-некробиотических процессов.

Саркома Крокеровского института. В 1914 г. в Крокеровском институте (США) у одной мыши на месте прививки штамма аденокарциномы возникла полиморфная саркома, перевивка которой дала начало штамму, получившему название саркомы 180, или крокеровской саркомы. Поданным этого института, прививаемость опухоли с 1914 по 1925 г. составляла 90—100%, а самопроизвольное рассасывание наблюдалось менее, чем в 1%. К настоящему времени крокеровская саркома в значительной степени утратила тканевую специфичность и, так же как опухоль Эрлиха, представляет собой недифференцированную опухоль.

Крокеровская саркома прививается на мышей любой породы и линии в 60—100%, лучше на молодых. По нашим наблюдениям, прививка взвесью (после тщательной промывки материала) удается в 100%. После прививки кусочком, опухоли развиваются примерно в 70% случаев. По данным Денхэм и Стюарт, самопроизвольное рассасывание опухоли наблюдается в 6% после изъязвления кожи над опухолью. При прививке взвесью опухоль появляется очень быстро. На 5—8-й день диаметр узелков достигает уже 3—5 мм, на 14—20-й день — 20—30 мм, на 25—30-й день — до 40 мм. Средний вес опухоли на 25—30-й день составляет, по нашим данным, от 3 до 6 г.

Опухоль растет в виде плотного узла, окруженного довольно толстой капсулой, но обладает выраженной способностью прорастать окружающие ткани в поздние сроки развития. На 2-й неделе появляется сухой некроз кожи над центром опухоли, который в последующем значительно западает. Опухоль состоит из сплошной массы недифференцированных, беспорядочно расположенных крупных клеток разнообразной величины, с базофильной протоплазмой. Ядра полиморфны с глыбчатым расположением хроматина. Часто встречаются гигантские клетки. Митозы многочисленны, часто наблюдаются атипические митозы.

Некробиотические процессы в крокеровской саркоме выражены в значительной степени. Кроме центрального некроза, как правило, обширного, всегда можно видеть (даже простым глазом) мелкие участки некроза в периферической, растущей части опухоли. В участках опухоли, примыкающих к зонам некроза, отмечаются поля атрофии клеток, пикноза и лизиса ядер, а также кариорексиса. Часто отмечаются кровоизлияния в ткань опухоли. Строма опухоли представлена крайне скудным количеством соединительной ткани, располагающейся вдоль сосудов.

Крокеровская саркома изредка дает метастазы в легкие. Быстрый рост и высокая степень злокачественности делают этот штамм удобным тест-объектом при экспериментальной терапии, в частности при первичном отборе химиопрепаратов. Менее пригодна саркома крокеровского института для исследований в области биохимии и иммунологии опухолей вследствие быстро развивающихся и распространенных некробиотических процессов.

Гепатома XXII. Штамм мышиной гепатомы получен в 1951 г. В. И. Гельштейн. Исходная опухоль возникла у самца линии С3НА, получавшего ортоаминоазотолуол. По микроскопическому строению это был солидный печеночноклеточный рак.

Подробное описание 10 генераций штамма опубликовано и потому мы приведем лишь основные сведения об этой опухоли. Гепатома XXII прививается на молодых (1 — 1 1/2 месяцев) мышах линии С3НА. В течение первых генераций опухоль прививалась лучше кусочком, чем взвесью ткани (79,6 и 34,7% соответственно). Латентный период появления опухолей составлял 1 — 1 1/2 месяца, темп роста крайне медленный. Вес 9—10 г опухоли достигали лишь через 5 месяцев после появления.

В настоящее время гепатома прошла большое число генераций и основной штамм почти не изменил первоначальных свойств (В. И. Гельштейн, 1958 г., неопубликованные данные). В Институте экспериментальной и клинической онкологии поддерживается подштамм гепатомы XXII с латентным периодом развития в 5—10 дней и более быстрым темпом роста. В связи с этим в опухолях подштамма отмечается большее количество некроза в более ранние стадии развития. Прививаемость достигла 100%. Изредка наблюдается самопроизвольное рассасывание уже развившейся опухоли (0—1,6%). Продолжительность жизни животных с момента прививки 21—75 дней.

Гепатома растет в виде довольно мягких бугристых узлов. В поздние сроки участки кровоизлияния, некроз и кисты могут занимать значительную часть опухоли. Гепатома обладает экспансивным ростом, метастазы в легкие появляются в 2,8—8,7% случаев. Состоит она из мелких клеток, сходных с печеночными, которые располагаются в виде сплошных полей или образуют ячеистые структуры. В старых опухолях отмечаются дегенеративные изменения клеток, которые могут быть в этом периоде значительно атипичными. Митотическая активность клеток гепатомы умеренная. Строма опухоли представлена прослойками плотной соединительной ткани, разделяющими эпителиальные массы на отдельные узлы. К соединительнотканным элементам относятся и вытянутые клетки типа клеток Купффера.

Так как гепатома XXII в значительной степени сохранила свою тканевую специфичность, она может служить моделью печеночноклеточного рака при экспериментальной терапии и изучении вопросов иммунологии и биохимии опухолей.

Карцинома Герена (опухоль Т-8). В 1934 г. П. Герен и М. Герен получили перевиваемую эпителиальную опухоль матки у крысы. Она возникла спонтанно у беспородной белой крысы и была типичной аденокарциномой. К 16-му пассажу опухоль представляла собой малодифференцированный рак, изредка образующий железистые структуры. В настоящее время карцинома Герена прошла большое число генераций и довольно широко используется в различных исследованиях. Опухоль прививается у крыс обоего пола любой породы и линии, по данным П. Герен и М. Герен, лучше на более взрослых, чем на молодых. Прививаемость колеблется от 50 до 90%, составляя в среднем, по данным Е. Е. Погосянц, 75%. Спонтанное рассасывание не наблюдается.

Латентный период появления пальпируемой опухоли (7—8 мм в диаметре) равняется 7—10 дням. Однако некоторые опухоли достигают этой величины лишь к 14—16-му дню, хотя в дальнейшем они растут быстро. У карциномы Герена значительно выражена двухфазность роста (медленный и неравномерный рост в течение первых 10—14 дней и быстрый рост в последующие две недели). К 14—16-му дню опухоль достигает диаметра 15—18 мм, а к 24—30-му дню — 30—37 мм. По данным Лаборатории химиотерапии, карцинома Герена растет довольно неравномерно: средний вес опухоли к 24—29-му дню в разных опытах составлял от 7,4 до 41,7 г.

В подкожной клетчатке опухоль растет в виде мягких узлов, отграниченных очень тонкой соединительнотканной капсулой. Развившаяся опухоль содержит большое количество некротической ткани, часто пропитанной кровью, что объясняет указанную выше неравномерность роста. При подкожной прививке метастазы в регионарные лимфатические узлы появляются в 80—90% случаев. При прививке в печень метастазы в лимфатические узлы брюшной полости отмечаются в 100%. Гематогенные метастазы во внутренние органы (печень, поджелудочную железу, почки) встречаются редко.

Опухоль состоит из тяжей и сплошных полей клеток средней величины, с относительно большим ядром и с узким ободком базофильной протоплазмы. Ядра пузырькообразные, с небольшим количеством хроматина, располагающегося в виде тонкой сети преимущественно у клеточной оболочки; имеется 2—4 хорошо выраженных ядрышка. Митозов много. Характерным для карциномы Герена является расположение клеток в виде мелких ячеек и коротких тяжей, разделенных тонкими, но хорошо выраженными прослойками соединительной ткани. Образования истинных железистых структур не отмечается, псевдожелезистые структуры встречаются на отдельных участках. Наряду с обширными полями некроза наблюдаются многочисленные участки некробиоза (пикноз ядер, кариорексис, кариолизис и т. д.). Следует подчеркнуть, что по своей морфологии карцинома Герена больше похожа на эпителиальную опухоль, чем такие перевиваемые опухоли эпителиального происхождения, как опухоль Эрлиха, Броуна-Пирс и др.

Использование карциномы Герена как модели эпителиальной опухоли при различных онкологических исследованиях вполне оправдано, поскольку она по своим биологическим свойствам и морфологии в значительной мере сохранила свой эпителиальный характер. Чувствительность этой опухоли к известным противоопухолевым средствам позволяет использовать ее и при отборе и испытании новых химиотерапевтических агентов. Четкая структура ядра и многочисленные митозы делают ее удобным объектом наркологических исследований. Способность давать множественные метастазы выгодно отличает ее от других перевиваемых опухолей крыс и мышей. Недостатками опухоли, не снижающими, однако, ее ценность, является быстрое развитие некробиотических процессов и довольно неравномерный рост.

Саркома М-1. Штамм был получен в 1943—1947 гг. в лаборатории проф. Л. М. Шабада в результате перевивки саркомы, возникшей у крысы после введения 3,4-бензпирена. В настоящее время саркома М-1 прививается на беспородных крыс в 70—100%. Опухоль появляется на 5—6-й день после прививки и к 20—25-му дню достигает среднего веса 40,5 г. Основная масса животных с опухолью гибнет между 25-м и 35-м днем. Прививаемость и скорость роста саркомы М-1 выше в весенне-летний период. Самопроизвольного рассасывания опухолей при тщательной отмывке опухолевого материала в опытах Молькова и в наших не наблюдалось.

Саркома М-1 растет в виде относительно мягких узлов, вначале хорошо отграниченных от окружающих тканей соединительнотканной капсулой, но в поздние сроки она прорастает окружающие ткани и даже врастает в брюшную полость. Эта саркома обладает выраженной склонностью к распаду и кровоизлияниям. Уже в 10—12-дневных опухолях можно видеть хорошо выраженный центральный некроз.

При микроскопическом исследовании опухоль состоит из крупных полиморфных и веретенообразных клеток. Часто встречаются гигантские одноядерные клетки и лентовидные структуры со многими ядрами, отдаленно напоминающие опухолевые миобласты. Митотическая активность опухоли велика и на различных участках может значительно варьировать. Часто встречаются атипические митозы. Значительную часть опухоли занимает некротическая ткань в виде обширных участков, мелких очажков и микронекрозов, захватывающих небольшие группы клеток. Нередко отмечаются доля дегенеративных изменений опухолевых клеток. Строма саркомы М-1 представлена крайне скудным количеством соединительной ткани, располагающейся вдоль сосудов. Саркома М-1 является примером быстрорастущей саркомы крыс и может служить моделью соединительнотканной опухоли, в первую очередь при экспериментальной терапии опухолей.

Саркома 45. Штамм опухоли получен в 1947 г. 3. Л. Байдаковой в лаборатории проф. Л. А. Зильбера в результате прививки фибросаркомы, возникшей у крысы в подкожной клетчатке после введения 9,10-диметил-1,2-бензантрацена. Эта саркома прививается на беспородных крыс почти в 100%. Опухоль растет лучше на молодых (весом 80—120 г) животных, чем на взрослых (весом 150—200 г). Прививаемость ниже 100% зависит от инфицирования прививочного материала или от недостаточного освобождения его от некротической ткани. Самопроизвольное рассасывание опухолей, достигших 1—1,5 см в диаметре, наблюдается менее, чем в 1%. Опухоль обладает умеренным темпом роста. На 5—8-й день диаметр опухоли достигает 8—15 мм, на 12—14-й день — 20—30 мм и на 21—25-й день — 40—60 мм. Большинство крыс с опухолью погибает на 25—35-й день. Средний вес опухоли к 20—25-му дню составляет 37,4 г. Как правило, саркома 45 растет довольно равномерно. Сезонные колебания в прививаемости и темпе роста невелики.

Опухоль растет в виде плотных узлов, хорошо отграниченных от окружающих тканей довольно толстой капсулой, которую она почти никогда не прорастает. В отдельных генерациях может отмечаться резкое замедление темпа роста и в этих случаях опухоли представляют собой небольшие, исключительно плотные узлы. Для поддержания штамма эти опухоли брать не следует, так как при дальнейших перевивках медленный темп роста сохраняется. Количество некротической ткани в молодых опухолях (10—12 дней) невелико, в хорошо развившихся (15—20 дней) всю центральную часть опухоли занимает некроз. Кровоизлияния в ткань опухоли встречаются непостоянно. Характерно образование больших полостей с желтовато-бурой или слегка геморрагической жидкостью. Метастазы при саркоме 45 не наблюдаются.

Опухоль состоит из веретенообразных клеток типа фибробластов. Ядра клеток пузырькообразные, с глыбчатым расположением хроматина и несколькими ядрышками, протоплазма отчетливо базофильна. Опухолевые клетки складываются в беспорядочно расположенные пучки, а иногда образуют вытянутые лентовидные структуры с несколькими ядрами. Митозов в опухоли много, часто встречаются атипические митозы. Рядом с полями некроза наблюдаются зоны пикноза ядер и лизиса клеток, кариорексиса, отека ткани и клетки с вакуолизированной цитоплазмой. Строма опухоли представлена крайне незначительным количеством соединительной ткани, располагающейся по ходу сосудов.

Так как саркома 45 в значительной степени сохранила свою тканевую специфичность, она может служить моделью саркомы при экспериментальной терапии опухолей. Относительно небольшое количество некроза, особенно в молодых опухолях, делает ее удобным объектом при некоторых биохимических и иммунологических исследованиях.

Перевиваемая опухоль кроликов Брауна-Пирс. Происхождение этой опухоли не совсем ясно. Браун и Пирс, описавшие первые 12 генераций этой опухоли, считали ее карциномой эпидермального происхождения. На основании опытов по эксплантации М. Меллендорф и В. Меллендорф приходят к выводу о соединительнотканной природе опухоли. Н. Г. Хлопин и Н. И. Григорьев отрицают это и считают весьма вероятным, что клетки опухоли являются производными целомического эпителия. Несмотря на то, что полностью отрицать возможность эпидермального происхождения опухоли нельзя, клеточные элементы ее в настоящее время достигли такой степени катаплазии, что вряд ли можно считать опухоль Брауна-Пирс моделью эпидермального рака.

Опухоль прививается обычно в яичко и растет у кроликов всех известных пород. Прививаемость ее высока, хотя и обнаруживает некоторые колебания — на материале 8 лабораторий 85—90%. Летом она прививается хуже. Латентный период при прививке в яичко, по данным разных авторов, колеблется от 3—4 до 6—18 дней. В отдельных случаях опухоль появляется лишь через 3—4 недели.

Характерной особенностью опухоли является ее лимфогематогенное метастазирование. Частота метастазирования до 90—100%. Метастазы появляются, начиная со 2-й недели, и постоянно обнаруживаются с 4-й. При прививке в яичко метастазы часто наблюдаются по ходу семенного канатика, в регионарных лимфатических узлах, в различных участках брюшины, в печени, почках, легких, редко в селезенке, желудке, сердце, но не в скелетных мышцах. Преимущественная локализация метастазов весьма варьирует. Частота и характер метастазирования опухоли меняются в зависимости от места прививки и при различных воздействиях на нервную систему животных.

Продолжительность жизни кроликов колеблется от 2 до 10 недель. По данным Г. Ф. Дядюши и Н. Туркевича, до 15-го дня гибнет 35,2%, от 15-го до 25-го — 41%, после 25-го дня — 23,8% кроликов. Следует иметь в виду, что отдельные кролики могут жить очень долго.

Несмотря на выраженную злокачественность, опухоль иногда (даже при прививке в яичко) подвергается самопроизвольному рассасыванию: по данным Я. А. Нафтольева — в 8%, по данным лаборатории штаммов — от 0,6 до 5%, по сводным данным Е. Е. Погосянц — в 1—2%. При других способах прививки опухоль рассасывается чаще. По В. А. Чепурину опухоли рассосались у 29 из 33 кроликов, привитых внутрикожно. По данным Ю. Н. Молькова, при внутрикожной прививке рассасывание наблюдается в 93% случаев, при подкожной — в 80%, при внутримышечной — в 67%. Рассасывание даже хорошо развившейся опухоли происходит и при прививке в переднюю камеру глаза. Самопроизвольное или искусственно вызванное рассасывание сопровождается образованием специфических антител, что создает возможность специфической иммунизаци.

При микроскопическом исследовании клетки опухоли небольшие, округлой или полигональной формы, растут сплошной массой, не образуя никаких структур. Ядра крупные, с большим количеством хроматина, в виде довольно грубой сети, весьма полиморфны. В опухоли много митозов, встречаются атипические митозы. Кроме сплошного центрального некроза, наблюдающегося даже в небольших по размеру метастатических узлах, имеются также мелкие участки некробиоза, разделяющие поля жизнеспособных клеток. Строма опухоли выражена слабо.

Таким образом, опухоль Брауна-Пирс является весьма злокачественной, крайне дедифференцированной и в этом отношении представляет определенную ценность для экспериментальной терапии. Однако следует подчеркнуть, что довольно значительные колебания прививаемости, темпа роста, особенно частоты и распределения метастазов, требуют большой осторожности при оценке действия того или иного агента. В таких случаях особенно нужен достаточный контрольный материал, полученный в тех же условиях. Массивность поражения делает эту опухоль удобным объектом изучения общих изменений в организме, происходящих при развитии опухолевого процесса, а также вопросов биохимии и иммунологии.

В заключение необходимо остановиться на некоторых общих вопросах трансплантации опухолей. Как указывалось выше, отдельные опухоли данного штамма однородны по своим свойствам в гораздо большей степени, чем, например, отдельные спонтанные опухоли одного и того же гистогенеза. С другой стороны, свойства штамма в ряде генераций остаются относительно постоянными. Однако эта однородность и относительное постоянство свойств некоторыми авторами рассматривается почти как абсолютное. Крайним выражением подобной точки зрения является сравнение штаммов перевиваемых опухолей с чистыми культурами микроорганизмов и с химически чистыми веществами.

Приведенные в нашей работе сведения показывают, что свойства любого штамма перевиваемых опухолей в разных генерациях испытывают значительные колебания. Время появления опухолей, прививаемость данного штамма, частота спонтанного рассасывания, средний вес развившихся опухолей в руках разных исследователей и даже одного исследователя могут значительно варьировать.

Весьма существенным фактором, определяющим колебания таких свойств, как латентный период, прививаемость, темп роста, частота спонтанного рассасывания являются особенностью методики у различных исследователей. Максимальная однородность в количестве прививаемого материала достигается при использовании асцитных вариантов опухолей. Следует подчеркнуть, что роль инфекции в изменении свойств штаммов перевиваемых опухолей учитывается далеко не всеми исследователями, между тем инфекция опухоли кокковой флорой часто сопровождается лишь замедлением роста, а не рассасыванием опухоли и передается из генерации в генерацию. Другим фактором, определяющим свойства данного штамма, является совокупность условий содержания животных: достаточность и полноценность питания, чистота и влажность воздуха в помещении, освещение, количество животных в клетке и т. д. Поэтому при передаче штамма из одной лаборатории в другую следует всегда помнить о возможности иногда резкого изменения его свойств. Каждая лаборатория должна иметь свою собственную характеристику поддерживаемого в ней штамма.

Колебания в скорости роста отдельных опухолей зависят от того, что клетки различных участков исходной перевиваемой опухоли обладают различным темпом роста, сохраняющимся при дальнейшем пассировании. Избежать влияния таких колебаний на точность результатов опыта можно лишь при достаточном количестве животных, допускающем статистическую обработку материала.

Опыт научно-исследовательской работы показывает, что достижение максимально постоянных свойств любого штамма возможно лишь в том случае, если поддержание штамма сосредоточено в одних руках (лаборатория штаммов, кабинет штаммов или научный работник, ведающий штаммами перевиваемых опухолей).

См. далее: Гетеротрансплантация опухолей >>





Питание при раке


Каким должно быть питание при онкологических заболеваниях? Какие продукты абсолютно противопоказаны при той или иной форме рака?

Узнать подробности >>


Фитотерапия в онкологии


Фитотерапия способна оказать существенную помощь не только в лечении онкологических заболеваний, но также и в их профилактике.

Узнать подробности >>


Наследственность и рак


Многих людей, имеющих у себя или у родственников онкологическое заболевание, интересует вопрос: передается ли рак по наследству?

Узнать подробности >>


Рак при беременности


Лечение рака во время беременности является довольно сложным, ведь большинство лекарственных средств обладает токсичностью.

Узнать подробности >>


Беременность после рака


Какие перспективы у беременности после перенесенного онкологического заболевания? Следует ли выдерживать срок после лечения рака?

Узнать подробности >>


Профилактика рака


Профилактика является важной частью общей борьбы с онкологическими заболеваниями. Как же уменьшить вероятность возникновения рака?

Узнать подробности >>


Паллиативное лечение рака


Что представляет из себя паллиативное лечение рака? Как оно может повлиять на качество жизни онкологического больного и изменить ее к лучшему?

Узнать подробности >>


Новые методы лечения рака


Учеными разработано достаточно много перспективных методов лечения рака, пока еще не признанных официальной медициной. Но все может измениться!

Узнать подробности >>


Статистика онкозаболеваний


Статистика заболеваемости раком, к сожалению, неутешительна: наблюдается рост числа заболевших, при этом болезнь «молодеет».

Узнать подробности >>


О «народной» медицине


Иногда «народными» методами удается победить рак, но тех, кто уповал только на них и в итоге покинул этот мир раньше времени - намного больше.

Узнать подробности >>


Как бороться с раком?


Как найти силы для борьбы с раком? Как не впасть в отчаяние от возможной инвалидности? Что может послужить надеждой и смыслом жизни?

Узнать подробности >>


Как помочь близким?


Как помочь близкому человеку жить с диагнозом «рак»? Нужна ли «ложь во спасение»? Как вести себя, чтобы близкие люди меньше страдали?

Узнать подробности >>


Стресс и рак


Бытует такое мнение, что постоянные стрессовые ситуации способны привести к развитию онкологических заболеваний. Так ли это?

Узнать подробности >>


Борьба с кахексией


Многие онкологические больные часто страдают от резкой потери веса. Чем это вызвано и можно ли как-то справиться с этой проблемой?

Узнать подробности >>


Уход за лежачими больными


Правила ухода за больными, вынужденными постоянно находиться в кровати, имеют свои особенности и их нужно обязательно знать.

Узнать подробности >>
Онкологический портал     Про наш сайт     Разместите информацию о своей клинике     Напишите нам     Литература     Поиск по сайту
© При цитировании материалов сайта гиперссылка на wincancer.ru обязательна.